全自動(dòng)菌落計數儀因其使用的自動(dòng)化程度高、分析結果可核對、樣品信息可留存等,已逐漸被越來(lái)越多的科研院所、衛生疾控部分所喜愛(ài)。
如何選型,才能獲得性能較好的菌落計數儀,并取得高性?xún)r(jià)比呢?這得從該類(lèi)儀器的原理來(lái)解釋?,F今面市的所有全自動(dòng)菌落計數儀均是采用成像分析法實(shí)現自動(dòng)計數的,即由成像硬件+分析軟件所組成,這二塊內容的任何一塊上出現失分,都會(huì )嚴重影響計數分析結果的穩定性。
一、成像硬件的選型
成像硬件用于獲得清晰有效的菌落圖像,以便分析計數?,F今的成像硬件有拍照成像的、掃描成像的。由攝像頭拍照成像的優(yōu)點(diǎn)是:成像速度快,能確保在0.5秒內獲得菌落圖像。由單反相機、卡片機拍照成像的優(yōu)點(diǎn)是:能自動(dòng)對焦、且像素分辨率一般更高,但其成像需要3~4秒的時(shí)間。
然而,拍照成像的致命弱點(diǎn)是:成像環(huán)境中的光線(xiàn)強度,無(wú)論是暗視野,還是背光,想要做到圖像中心與邊緣保持*一致,相對來(lái)說(shuō)比較困難。從而引起平皿上亮度的不一致。
針對環(huán)境光干擾成像方面,通過(guò)對儀器照明系統進(jìn)行精密的設計,上下光源采用了寬光帶的LED柔光系統,并結合"懸浮式暗視野"成像系統,不僅能夠消除玻璃培養皿的折射光斑,而且通過(guò)改變光比,使得菌落表面的皺折、凹陷、邊緣的鋸齒更富立體感。
掃描成像與在燈箱中營(yíng)造均勻面光源不同,是將線(xiàn)光源通過(guò)移動(dòng)變成面光源的,光線(xiàn)強度相對比較均勻,其均勻度通常比拍照燈箱的面光源要高一個(gè)數量級,從成像硬件的上解決了菌落目標的亮度不勻問(wèn)題,但掃描只是平面的效果,不能展現培養基表層和深層的細微菌落,且不能展現菌落顏色等多方面的情況,對于觀(guān)察分析而言構成了一定難度。
二、分析軟件的選型
分析軟件是全自動(dòng)菌落計數儀 的另一塊核心成分。因為菌落生物的存在多樣性,在培養基上的表現或顯像不可能大體一致,針對這類(lèi)變化,在分析軟件選型上要考慮:對于各類(lèi)成像干擾的自動(dòng)排出能力。
比如:是否能自動(dòng)矯正背景,等等。另外,對于嚴重粘連在一起的團裝、鏈狀分布菌落,將其自動(dòng)分割開(kāi)來(lái)的水平,也是評價(jià)分析軟件的考量指標。尤其是:對于同類(lèi)菌落的"一鍵"化的智能分類(lèi)計數能力,以及對于菌落計數分類(lèi)的自動(dòng)識別學(xué)習能力,更是評價(jià)分析軟件的關(guān)鍵考量指標。
現在比較好的分析軟件,具有圖像處理、圖像編輯、統計功能、測量功能、數據庫管理、以及對抗生素效價(jià)分析、藥敏分析功能、多培養皿統計、螺旋平皿統計等一系列功能。